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Perché la coltura cellulare lisa prima i globuli rossi?

2022-12-23

Introduzione di base
Il lisato di eritrociti è uno dei metodi più semplici e facili per rimuovere i globuli rossi, cioè per dividere i globuli rossi con il lisato, che non danneggia le cellule nucleate e può rimuovere completamente i globuli rossi. La scissione del lisato è un metodo delicato di rimozione dei globuli rossi, utilizzato principalmente per la separazione e la purificazione delle cellule tissutali disperse dalla digestione enzimatica, la separazione e la purificazione dei linfociti e la rimozione dei globuli rossi negli esperimenti di proteine tissutali e nucleico estrazione acida. Le cellule tissutali ottenute dal lisato dei globuli rossi non contengono globuli rossi e possono essere ulteriormente utilizzate per coltura primaria, fusione cellulare, citometria a flusso, separazione ed estrazione di acido nucleico e proteine, ecc.

Istruzioni per l'uso
Campione di cellule di tessuto
1. I tessuti freschi sono stati digeriti dal pancreas/enzima o dalla collagenasi e dispersi in una singola sospensione cellulare, e il supernatante è stato scartato mediante centrifugazione.

2. Prendere il lisato ELS dal frigorifero a 4℃, aggiungere il lisato ELS al precipitato cellulare in un rapporto di 1:3-5 (aggiungere 3-5 ml di lisato a 1 ml di cellula compattata), soffiare delicatamente e mescolare.

3. Centrifugare a 800-1000 giri/min per 5-8 minuti ed eliminare il liquido trasparente rosso superiore.

4. La parte precipitata è stata raccolta e centrifugata con soluzione di Hank o soluzione di coltura priva di siero per 2-3 volte.

5, se la fessurazione non è completa/completa si possono ripetere i passaggi 2 e 3.

6. Celle di risospensione per esperimenti successivi; Se l'RNA viene estratto, è meglio farlo nella soluzione preparata dal passaggio 4 utilizzando acqua DEPC

I globuli rossi hanno un ciclo di vita molto breve, solo 120 giorni, ma riproducono il sangue molto velocemente, e in questo caso sono particolarmente capaci di divisione cellulare, e sono le cellule che si dividono più velocemente di tutte, quindi questa cellula è molto preziosa, quindi è molto utile per la coltura cellulare. È molto semplice, non contiene organelli, solo membrane cellulari e proteine.

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