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Come scegliere i recipienti per coltura cellulare giusti?

2024-11-29

La scelta del giusto materiale di coltura è fondamentale per garantire una crescita cellulare ottimale e risultati sperimentali. Quando si scelgono i recipienti per coltura cellulare, è importante considerare fattori quali il tipo di cellula, lo scopo specifico della coltura, la scala della coltura, il tipo di terreno di coltura, i materiali e le dimensioni dei recipienti, i trattamenti superficiali, i coperchi per una corretta scambio di gas e la loro compatibilità con le apparecchiature di laboratorio.

Ecco i fattori chiave da considerare quando si seleziona il recipiente per coltura cellulare giusto

1. Scegliere il recipiente per la coltura cellulare in base al tipo di cellule

Cellule aderenti

Queste cellule necessitano di una superficie a cui attaccarsi e diffondersi. Per le cellule aderenti, avrai bisogno di vasi con un'area superficiale che fornisca spazio sufficiente per l'attaccamento e la crescita delle cellule.

Esempi Flaconi trattati con colture di tessuti, piastre di Petri e piastre a pozzetti multipli.

Celle di sospensione

Queste cellule crescono fluttuando nel mezzo, quindi non viene considerata una superficie.

EsempiPalloni per colture tissutali, palloni rotanti o bioreattori per colture in sospensione su larga scala.

2. Scegliere il recipiente per la coltura cellulare in base alle dimensioni (capacità del volume)

Culture su piccola scala

Per esperimenti su piccola scala o screening ad alto rendimento, i recipienti più piccoli sono l'ideale.

Esempi Piastre multipozzetto (piastre per coltura da 6, 24, 96 cellule),Piastre di Petrio palloni T25.

Culture su larga scala

Se è necessario coltivare grandi quantità di cellule, è meglio utilizzare recipienti più grandi o bioreattori.

Esempi Boccette per colture cellulari T75 e T175, bioreattori o fiasche rotanti per colture cellulari in sospensione.

3. Scegliere il recipiente per la coltura cellulare in base al trattamento superficiale

Superfici trattate con colture di tessuti

I vasi sono pretrattati per favorire l'attaccamento cellulare, rendendoli adatti a tipi di cellule aderenti. Questi sono generalmente rivestiti con sostanze come collagene, fibronectina o altri componenti della matrice extracellulare.

Superfici non trattate

Ideale per colture in sospensione o quando le cellule non hanno bisogno di aderire alla superficie. Di solito vengono utilizzati per le cellule che crescono liberamente nel mezzo.

4. Scegliere il recipiente per la coltura cellulare in base al materiale

Polistirene comunemente utilizzato per applicazioni di colture cellulari standard. È trasparente, consente una facile ispezione visiva e funziona bene sia per le cellule aderenti che per quelle in sospensione.

Il policarbonato o il polipropilene vengono utilizzati per alcune applicazioni di bioreattori e per recipienti che richiedono maggiore flessibilità o trattamenti superficiali specifici.

Vetro utilizzato per colture di tessuti standard, a causa del costo e della fragilità, i recipienti di vetro possono essere adatti per applicazioni specifiche o colture su larga scala.

5. Scegli ilmateriali di consumo per colture cellulariin base al design della nave

Boccette

Per la coltura cellulare generale, vengono comunemente utilizzate le fiasche a T (T25, T75, T150). La superficie piana fornisce una buona area per l'attaccamento e la crescita delle cellule. Possono essere utilizzati sia per cellule aderenti che per colture in sospensione se vengono mantenute le condizioni appropriate.

Piastre di Petri

Comune per colture su piccola scala e per esperimenti che richiedono osservazione, come i test sulla formazione di colonie.

Piastre multipozzetto

Questi sono utili per lo screening ad alto rendimento e gli esperimenti su scala ridotta. Piatti da 6, 12, 24, 48,96Sono disponibili 384 pozzetti, ideali per analisi cellulari, rilascio di citochine, test antidroga e altre applicazioni ad alta produttività.

Palloni rotanti

Utilizzato per colture cellulari in sospensione, in particolare in volumi più grandi dove è necessaria un'agitazione controllata per mantenere la crescita cellulare ed evitare l'aggregazione cellulare.

Bioreattori

Per la coltura in sospensione su larga scala, i bioreattori consentono un controllo più complesso delle condizioni ambientali (ad esempio pH, temperatura, ossigenazione) e vengono utilizzati per la produzione di grandi volumi, come nella produzione biofarmaceutica.

6. Scegliere il recipiente per coltura cellulare in base alla sterilità e alla ventilazione

Sterilità

Assicurarsi che il recipiente sia sterile o sia stato sterilizzato per evitare la contaminazione. La maggior parte dei recipienti di coltura commerciali sono presterilizzati, ma controlla sempre la confezione.

Ventilazione

Alcuni contenitori, come le boccette, sono dotati di tappi o filtri ventilati per consentire il ricambio d'aria prevenendo la contaminazione. Ciò è essenziale quando si coltivano cellule in condizioni di alta densità.

7. Scegliere il recipiente per la coltura cellulare in base alla comodità d'uso

Autoclavabile vs monouso

Alcuni recipienti di coltura possono essere sterilizzati in autoclave per il riutilizzo (ad esempio, bottiglie di vetro, alcuni flaconi di plastica), mentre altri sono monouso e usa e getta (ad esempio, piastre di Petri in plastica, piastre a pozzetti multipli).

Movimentazione e Trasporto

Considera la facilità di trasferimento delle cellule tra vasi. Ad esempio, le piastre multipozzetto possono richiedere piastre specializzate per una facile gestione con apparecchiature quali pipettatori automatizzati.

8. Scegliere il recipiente per la coltura cellulare in base al volume del mezzo di coltura

Scegliere un recipiente in grado di ospitare il volume desiderato di terreno di coltura senza sprecare risorse. Se si lavora con una coltura ad alto volume, potrebbero essere necessari flaconi o bioreattori più grandi, mentre volumi più piccoli sono adatti per piastre o piastre per colture cellulari.

9. Scegliere il recipiente per coltura cellulare in base a considerazioni sui costi

Monouso e riutilizzabili

I contenitori di plastica usa e getta sono economici e riducono il rischio di contaminazione, ma possono essere costosi per operazioni su larga scala. I contenitori in vetro riutilizzabili hanno un costo iniziale più elevato ma possono essere sterilizzati e riutilizzati più volte, il che li rende più economici per un uso a lungo termine.

Efficienza del volume

Assicurarsi che le dimensioni del recipiente siano adeguate per evitare sprechi di materiali, soprattutto quando si utilizzano terreni di crescita o reagenti costosi.

10. Scegliere il recipiente per coltura cellulare in base ai requisiti applicativi specifici

Imaging

Se è necessario visualizzare le cellule al microscopio, scegliere recipienti con materiali otticamente trasparenti e dimensioni adeguate per l'impostazione dell'imaging (ad esempio, piastre multipozzetto per lo screening ad alto contenuto o piastre con fondo in vetro per l'imaging di cellule vive).

Agitazione controllata

Per le colture cellulari in sospensione, prendere in considerazione fiasche rotanti o bioreattori che forniscono agitazione controllata per mantenere le cellule uniformemente sospese.

Conclusione

La scelta del recipiente di coltura cellulare giusto richiede il bilanciamento di diversi fattori, tra cui il tipo di cellula, la scala di coltura, la compatibilità dei materiali e le esigenze sperimentali specifiche. Le cellule aderenti richiederanno superfici che promuovano l'attaccamento, mentre le cellule in sospensione traggono vantaggio da volumi e agitazione maggiori. Per lavori su piccola scala, piastre multipozzetto o fiasche a T possono essere sufficienti, mentre le colture più grandi possono richiedere fiasche rotanti o bioreattori. Assicurarsi sempre che i recipienti soddisfino i requisiti di sterilità e di manipolazione e considerare il rapporto costo-efficacia in base all'utilizzo.

Considerando questi fattori, è possibile selezionare il recipiente ottimale che fornisce le giuste condizioni per la coltura cellulare e gli obiettivi sperimentali.

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